Evaluar la morfología de los espermatozoides
¿Cómo evaluar la morfología de los espermatozoides?
Aproximadamente el 15% de las parejas tienen problemas de infertilidad. Evaluar la morfología de los espermatozoides es un parámetro importante para la fertilización exitosa. En las técnicas de reproducción asistida (Kuster et al., 2004), los criterios de Kruger (1986) y la clasificación de la OMS son los más importantes. De acuerdo con los criterios de Kruger, la cabeza, el cuello y la cola de los espermatozoides deben ser normales y el acrosoma debe cubrir el 70% de la cabeza.
Hay muchas manchas disponibles como Papanicolau, hematoxilina, eosina, Gimsa, Diff quik, etc. (Sanchezet al., 1994).
En este artículo explicamos cómo hacer la mancha con Diff Quik.
Procedimiento
- Dispense las soluciones Diff-Quik® en frascos de tinción con tapa o con cualquier otro dispositivo de tinción por inmersión.
- Prepare los portaobjetos de la misma manera que para una técnica Pappenheim (frotis de muestra en un cleanslide (ponga 10 μL para cada frotis y deje que se seque al aire).
- Sumergir la Diapositiva 7 inmersión o 1 minuto en Solución Fijadora (en Humano, en otro animal el tiempo es diferente). Deje que el exceso drene cada inmersión.
- Sumergir Diapositiva 7 inmersión o 1 minuto en Tinción Solución I (en Humano, en otro animal el tiempo es diferente) . Permita que el exceso se drene después de cada inmersión.
- Sumergir la diapositiva 7 en inmersión o 1 minuto en Stain Solution II (en humanos, en otros animales el tiempo es diferente).
- Permitir que el exceso se drene después de cada inmersión. Enjuague con agua destilada (suavemente)
- Permitir Deje secar al aire y proceda con la diferenciación. Mire la muestra en el microscopio. Si observa tinción con poca tinción, repita los pasos 4 y 5.
NOTA: Si la muestra está muy concentrada, tenga en cuenta que es necesario llevar a cabo una dilución adecuada (que es similar a las imágenes).
Put the microscope in bright field and use 40X objective.
Proiser … because sperm matters!
